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| 液相色譜儀常用檢查器的品種 |
| 檢查器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的改變轉化為可供檢查的信號，常用檢查器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發(fā)光等。 1.紫外可見吸收檢查器（ultraviolet－visible detector，UVD） 紫外可見吸收檢查器（UVD）是HPLC中運用zui廣泛的檢查器之一，簡直一切的液相色譜儀都配有這種檢查器。其特點是靈敏度較高，線性規(guī)模寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質檢查限可達1ng，檢查后不損壞樣品，可用于制備，并能與任何檢查器串聯(lián)運用。紫外可見檢查器的作業(yè)原理與構造同通常分光光度計類似，實際上即是裝有活動地的紫外可見光度計。 （1）紫外吸收檢查器 紫外吸收檢查器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)規(guī)模的接連波長，并裝置一個光柵型單色器，其波長挑選規(guī)模寬（190nm～800nm）。它有兩個流轉池，一個作參比，一個作丈量用，光源宣布的紫外光照射到流轉池上，若兩流轉池都經過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下簡直無吸收，光電管上接受到的輻射強度持平，無信號輸出。當組分進入丈量池時，吸收必定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號巨細與組分濃度有關。 約束：活動相的挑選受到必定約束，即具有必定紫外吸收的溶劑不能做活動相，每種溶劑都有截止波長，當小于該截止波長的紫外光經過溶劑時，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢查器的作業(yè)波長不能小于溶劑的截止波長。 （2）光電二極管陣列檢查器（photodiode array detector， PDAD） 也稱疾速掃描紫外可見分光檢查器，是一種新式的光吸收式檢查器。它選用光電二極管陣列作為檢查元件，構成多通道并行作業(yè)，一起檢查由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列疾速掃描收集數據，得到吸收值(A)是保存時刻(tR)和波長(l)函數的三維色譜光譜圖。由此可及時調查與每一組分的色譜圖相應的光譜數據，然后敏捷決議具有*挑選性和靈敏度的波長。 單光束二極管陣列檢查器，光源宣布的光先經過檢查池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使一切波長的光在接收器上一起被檢查。陣列式接收器上的光信號用電子學的辦法疾速掃描獲取出來，每幅圖象僅需求10ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。 2．熒光檢查器（fluorescence detector， FD） 熒光檢查器是一種高靈敏度、有挑選性的檢查器，可檢查能發(fā)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質可經過化學衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢查。其zui小檢查濃度可達0.1ng／ml，適用于痕量剖析；通常情況下熒光檢查器的靈敏度比紫外檢查器約高2個數量級，但其線性規(guī)模不如紫外檢查器寬。 這些年，選用激光作為熒光檢查器的光源而發(fā)生的激光誘導熒光檢查器極大地增強了熒光檢查的信噪比，因此具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量剖析中得到廣泛運用。 3. 示差折光檢查器（differential refractive Index detector， RID） 示差折光檢查器是一種濃度型通用檢查器，對一切溶質都有響應，某些不能用挑選性檢查器檢查的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢查器檢查。示差檢查器是根據接連測定樣品流路和參比流路之間折射率的改變來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時，因為兩種物質的折射率不一樣就會發(fā)生折射。只需樣品組分與活動相的折光指數不一樣，就可被檢查，二者相差愈大，靈敏度愈高，在必定濃度規(guī)模內檢查器的輸出與溶質濃度成正比。 4. 電化學檢查器（elec）chemical detector， ED） 電化學檢查器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等檢查器，屬挑選性檢查器，可檢查具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物安排和體液的代謝物、食物添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的運用。其間，電導檢查器在離子色譜中運用zui多。 電化學檢查器的長處是： ①靈敏度高，zui小檢查量～般為ng級，有目可達pg級； ②挑選性好，可測定很多非電活性物質中極痕量的電活性物質； ③線性規(guī)模寬，通常為4～5個數量級； ④設備簡略，本錢較低； ⑤易于主動操作。 5. 化學發(fā)光檢查器（c。iluminescence detector， CD） 化學發(fā)光檢查器是這些年發(fā)展起來的一種疾速、靈敏的新式檢查器，因其設備簡略、價廉、線性規(guī)模寬等長處。其原理是根據某些物質在常溫下進行化學反應，生成處于激起態(tài)勢反應中間體或反應產品，當它們從激起態(tài)回來基態(tài)時，就發(fā)射出光子。因為物質激起態(tài)的能量是來自化學反應，故叫作化學發(fā)光。當別離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與恰當的化學發(fā)光試劑混合，引起化學反應，致使發(fā)光物質發(fā)生輻射，其光強度與該物質的濃度成正比。 這種檢查器不需求光源，也不需求雜亂的光學系統(tǒng)，只需有恒流泵，將化學發(fā)光試劑以必定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物敏捷而又均勻地混合發(fā)生化學發(fā)光，經過光電倍增管將光信號成為電信號，就可進行檢查。這種檢查器的zui小檢出量可達10-12g。 |
